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收藏  |   举报 2015-12-29 11:40   关注:246   回答:0

活动尼龙袋法测定猪养分消化率的研究进展

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 摘要:对饲料原料营养价值的准确评定是研究动物营养需要和制定日粮配方的前提和基础。经过反复改进的活动尼龙袋法具有测定速度快、测定成本低、所需待测样品量小等优点,是一种测定猪饲料原料养分消化率的新方法。此方法最初被应用与反刍动物,后被引入单胃动物,经反复修改,已取得良好的效果。本文通过综述表明,活动尼龙袋法可以应用于猪饲料中各原料干物质、能量和粗蛋白的表观消化率。

  引言

  对猪饲料原料营养价值的准确评定是猪营养需要量工程中非常重要的部分,目前被广泛应用的主要包括全收粪法和指示剂法(戴?等,2008; 蒙景茂等,2008;Thacker和Qiao,2001;Sauer等,1989),但是耗时长、成本高,而且工作量过大是这些传统方法共有的缺点(Yin等,2002;Sauer等,1989)。早在1978年,Petty和Handlos就曾尝试使用尼龙袋测定猪饲料原料的消化率,1983年Sauer等在他们的基础上,结合反刍动物营养学方法,建立了活动尼龙袋法(Mobile nylon bag technical,MNBT),它具有测定速度快、测定成本低、所需待测样品量小等优点,而且经过十多年的改进,该技术不断地被完善,已经具有推广应用的价值。

  1 活动尼龙袋法的基本程序

  最早将尼龙袋技术应用于测定猪饲料原料消化率数据是Petty和Handlos,1978年,他们直接将装有饲料样本的尼龙袋从口送入猪的体内,直至排出,收集尼龙袋。结果发现由于尼龙袋在胃中停留时间过长,所以测定数据总是高于传统法所得数据。

  Sauer等(1983)在他们的基础上,创建了活动尼龙袋法,并且阐述了自己的操作程序:用网孔孔径为48 µm的单纤丝尼龙制作成25×40 mm的小尼龙袋,将1 g粉碎粒度为0.8 mm的待测饲料样品装入尼龙袋,首先置于盛有500 mL的0.01 N盐酸和胃蛋白酶溶液的烧杯中,将烧杯于37℃水浴中振荡2.5 h,溶液pH为2.0,胃蛋白酶含量为377.4 IU/L。然后将尼龙袋从烧杯中取出,通过十二指肠瘘管引入体重为40 kg左右的健康猪体内,待尼龙袋通过消化道后从粪中回收尼龙袋,用干纸巾轻轻揩去袋子表面粪便,冷冻干燥,测定袋内剩余物质中待测养分的含量,计算待测饲料养分消化率。

  但是,与传统法相比,用最初的活动尼龙袋技术所测得的消化率数值变异较大(Sauer等,1983)。为了找出变异来源,Graham等(1985)和Cherian等(1988,1989)用生长育肥猪做了进一步的研究,表明体外消化的pH、胃蛋白酶浓度和时间以及待测饲料粉碎粒度、尼龙布网孔孔径及尼龙袋大小对蛋白质表观消化率有显著影响,其中以饲料粉碎粒度影响最大。Lin等(1995)在比较研究全收集食糜法与MNBT测定饲料粗蛋白质(CP)、干物质(DM)和氨基酸回肠表观消化率时则观察到体外模拟消化条件,包括溶液pH、胃蛋白酶的活性及模拟消化的时间对测定结果没有影响。

  关于MNBT测定猪饲料养分方法中存在许多争议,如尼龙袋网孔孔径太小、饲料样品颗粒度和体外消化时间等。网孔孔径的大小直接影响了消化液和袋内物质的交换,过大低估饲料蛋白质和氨基酸的消化率(Sauer和de Lange.1989),过低则会高估。Graham等(1985)研究表明当网孔孔径为20 m时,部分细菌可以出入尼龙袋。仅几年又有学者表示,是否用水洗去尼龙袋上污染的粪便对MNBT方法的准确性具有显著的影响(Qiao和Thacker,2001)。根据Qiao和Thacker的最新的研究,经过完善的MNBT的测定程序为:首先将1 g粉碎粒度为1.0 mm的饲料原料放入网孔孔径为48 µm、大小为25×40 mm2的尼龙袋中,四面封口;然后在pH为2.0、胃蛋白酶浓度为377.41 IU/L的溶液中,体外消化4 h,然后通过十二指肠普通T型瘘管引入;最后,通过集粪袋回收尼龙袋,不能用水冲洗,分别测定。谯仕彦等(2002)利用改进的MNBT测定干物质、能量和粗蛋白是消化率,与传统法相比,相关性分布达到了93%、94%和76%,较未改进的MNBT有明显的提高。

  2 活动尼龙袋法测定饲养养分消化率

  2.1 饲料干物质消化率

  主要思路为总结所有研究中的结果,找出相关性,然后引出改进后尼龙袋法对测定准确度的提高。

  2.2 活动尼龙袋法测定饲料能量消化率

  (同前)主要思路为总结所有研究中的结果,找出相关性,然后引出改进后尼龙袋法对测定准确度的提高。

  2.3 活动尼龙袋法测定饲料粗蛋白消化率

  (同前)主要思路为总结所有研究中的结果,找出相关性,然后引出改进后尼龙袋法对测定准确度的提高。

  2.4 活动尼龙袋法测定饲料中其他成分的消化率

  主要思路为总结以前的实验,阐述回直肠吻合与MNBT结合的不可行性。


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